Product
 
Dyne Bio l Cloning l Cloning Kit
 
품번 DYK1020
품명 Dyne TA core kit
규격 20 rxns
제조사 Dyne Bio
 
+제품사양

제품설명

Dyne TA Kit와 Dyne TA core Kit는 Taq Polymerase로 증폭한 A-tail overhangs가 있는 PCR 산물을 실온에서 5분안에 클로닝이 가능한 제품이다. Kit 내 구성물로 말단이 공유결합된 topoisomerase가 포함된 vector가 제공되며 ligase 없이 A-tail overhangs을 갖는 DNA 절편을 벡터에 접합하는 데 유용하다.

 

제품특징

•반응시간 단축

•높은 클로닝 효율

•PCR 산물을 바로 사용가능

 

사용상의 주의

•PCR primer 5' 말단은 표적 DNA의 증폭을 위해 사용되며, 증폭된 DNA 5' 말단에는 인산기 (phosphate gorup)가 존재하지 않는다.

•퍼짐현상, 비특이적 밴드, primer-dimers산물이 보이거나 또는 PCR 산물이 1 kb 이상일 경우에는 PCR 산물을 정제하여 사용할 것을 권장한다.

•100 bp 보다 더 짧은 비특이적인 PCR 산물은 쉽게 TA 벡터에 붙을 수 있어 표적 DNA 클로닝 효율이 현저히 감소한다. 따라서 비특이적으로 증폭된 짧은 단편을 없애기 위해 반드시 PCR 산물을 정제하여 사용할 것을 권장한다.

•Pfu DNA polymerase로 증폭된 DNA 절편 클로닝을 위해 Dyne Blunt Kit (Cat. # DYK1030) 사용을 권장한다. 또는 Taq polymerase 1 unit을 Pfu 증폭반응 시 (72℃, 10분)에 첨가가 가능하며, 이에 따라 Taq polymerase에 의한 blunt end의 PCR 산물의 A-tail 합성이 가능하다. 이 방법으로 DNA 최종산물은 pDyne TA V2에 클로닝이 가능하다.

•주의할 점은 A-tail은 DNA 절편말단에 시토신 잔기가 있을 때 클로닝의 효과를 높이며, 이것은 oligonucleotide, PCR primer를 디자인할 때 꼭 고려해야 한다.

•클로닝에서 Taq polymerase를 사용하면 A 말단 보다는 C 말단에 A-tail을 붙여높은 효율을 얻을 수 있다.

 

응용분야

A-tail PCR 산물의 빠르고 효율적인 클로닝 (예: Taq으로 증폭된 DNA)

 

보관온도 : -20℃

 

품질관리

클로닝 효율: 99%

 

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